目的 本研究旨在阐明微小隐孢子虫亲环蛋白CpCyP1(Cryptosporidium parvum cyclophilin protein-1)的亚细胞定位和酶动力学等特征,为进一步深入研究其生物学功能和探索抗虫药物靶点提供基础。方法 采用荧光定量qRT-PCR,对CpCyP1基因在隐孢子虫不同发育时期转录水平进行分析;通过原核表达系统获得带有His标签的CpCyP1重组蛋白(His-CpCyP1),并用该蛋白免疫新西兰家兔以制备特异性抗血清,利用亲和层析技术纯化所得抗血清;通过Western blot检测子孢子中的CpCyP1蛋白表达,通过间接免疫荧光(IFA)技术确定CpCyP1在虫体内不同发育阶段的亚细胞定位;最后,通过吸光度比色法测定His-CpCyP1的肽基脯氨酰顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase, PPIase)活性,并评估环孢菌素A(cyclosporine A, CsA)对His-CpCyP1酶活性的影响。结果 CpCyP1基因在隐孢子虫的各个发育阶段均有转录,尤其在裂殖体和配子阶段表达量较高;CpCyP1蛋白在子孢子和细胞内阶段均定位于虫体胞浆内。酶动力学研究显示,CpCyP1对含脯氨酸的短肽底物的米氏常数K_m 为456.4 μmol/L,最大反应速率V_max为1.981 U[μmol/(min·μg)]。CsA与CpCyP1结合的解离常数K_d 为5.122 μmol/L,半数抑制浓度IC₅₀ 为1.004 μmol/L。结论 CpCyP1在隐孢子虫的各个发育阶段均有表达,并且重组的CpCyP1具有微摩尔级别的PPIase酶活性,该活性可以被CsA所抑制,这提示CpCyP1可能是CsA的潜在底物,因此,CpCyP1作为抗虫药物靶点的潜力值得进一步研究。

目的 通过系统性诊断试验的Meta分析,综合评估酶联免疫吸附实验(ELISA)、聚合酶链式反应技术(PCR)和胶体金层析试纸条法(GICA)在华支睾吸虫病诊断中的有效性。方法 通过知网、万方数据库、维普及PUBMED等多个平台进行文献检索,依据严格的纳入和排除标准筛选相关文献。采用RevMan 5.4与Sata 18对文献质量进行评估,并绘制漏斗图、森林图及SROC曲线。结果 共纳入50篇符合标准的文献。Deek′s漏斗图分析显示3种方法均未表现出显著的发表偏倚。合并效应量分析结果表明,ELISA法在华支睾吸虫病检测中的灵敏度为0.93(95% CI:0.89-0.95),特异度为0.94(95% CI:0.92-0.96),SROC曲线下面积为0.98。PCR法的灵敏度为0.93(95% CI:0.84-0.97),特异度为0.92(95% CI:0.80-0.97),SROC曲线下面积为0.97。GICA法的灵敏度为0.91(95% CI:0.83-0.96),特异度为0.95(95% CI:0.87-0.98),SROC曲线下面积为0.97。结论 在华支睾吸虫病的诊断中,ELISA、PCR及GICA均展现出较高的诊断价值,然而它们在灵敏度与特异度上各有差异。

目的 建立一种快速、敏感、特异、可同时检测隐孢子虫、球虫和牛细小病毒的多重PCR 检测方法。方法 针对隐孢子虫SSU rRNA基因、球虫SSU rRNA 基因、牛细小病毒VP2基因分别设计特异性引物并构建重组质粒标准品。经温度梯度PCR法和单一控制变量法优化反应条件,建立多重PCR检测方法并对其敏感性、特异性、重复性和临床应用进行评价。结果 多重PCR方法的最佳退火温度为60.5℃,球虫上下游引物各为0.2 μmol/L、隐孢子虫和牛细小病毒上下游引物各为0.4 μmol/L;建立的方法敏感性高,对隐孢子虫、球虫和牛细小病毒的重组质粒标准品的最低检测下限分别为243、260和3 110 copies;特异性强,与牛群常见沙门氏菌、病毒性腹泻病毒、轮状病毒等10种病原无交叉反应。重复性好,批内与批间实验结果均一致。利用建立的多重PCR方法对从四川甘孜州部分地区送检的81份临床腹泻样品进行检测,结果隐孢子虫、球虫和牛细小病毒的阳性率分别为18.52%(15/81)、34.57%(28/81)、18.52%(15/81),三者混合感染阳性率为3.7% (3/81)。结论 建立的隐孢子虫、球虫和牛细小病毒多重PCR 方法,可为临床3种常见牦牛腹泻病原的鉴别诊断及流行病学调查提供技术支持。

目的 白纹伊蚊是登革病毒的重要传播媒介,筛选和分析白纹伊蚊感染DENV2的免疫相关基因,为进一步开展登革病毒外潜伏期阻断研究提供科学依据。方法 通过文献筛选的方式从埃及伊蚊、冈比亚按蚊等与白纹伊蚊亲缘关系较近的物种中筛选出33个潜在的免疫相关基因,采用蛋白互作(protein protein interaction, PPI)分析基因蛋白的互作关系,采用qRT-PCR方法检测白纹伊蚊感染DENV2后中肠相关基因mRNA表达水平的变化。结果 PPI分析显示,白纹伊蚊的TLR和Spz,埃及伊蚊的Rel1、Rel2、DefC、Spz、PIWI、Ago2、DOME和HOP,以及冈比亚按蚊的Rel1、Rel2、CACT、STAT和DOME分别存在PPI互作关系。白纹伊蚊感染DENV2后,有10个基因表达差异显著,Ago3(7.39,P < 0.05)、DOMEa(1.63,P < 0.01)、DOMEb(21.29,P < 0.001)和TLRb(1.61,P < 0.05)显著上调。Rel1(0.62,P < 0.001)、CACTl(0.65,P < 0.001)、Rel2a(0.65、P < 0.01)、Rel2b(0.24、P < 0.001)、GATAa(0.64、P < 0.01)和DefC(0.28、P < 0.05)显著下调。结论 在检测的基因中,白纹伊蚊与埃及伊蚊的一致性高于冈比亚按蚊。DOMEb、Ago3、Rel2b和DefC等4个基因可作为后续开展DENV2免疫阻断研究的优选靶基因。

目的 初步调查中国边境“一带一路”重点口岸鼠形动物及其携带埃立克体和新埃立克体的情况。方法 对2022年在中国北部和南部“一带一路”沿线10个重点陆地边境口岸监测的鼠形动物进行形态学鉴定;并用巢式 PCR方法扩增埃立克体和新埃立克体的16S rRNA 基因,对阳性扩增产物测序后进行系统发育分析。结果 共捕获鼠形动物356只,共计2目5科15属20种,其中长爪沙鼠73只(20.51%)、褐家鼠61只(17.13%)、黑线姬鼠56只(15.73%)、狭颅田鼠58只(16.29%)。获得埃立克体属病原阳性序列1例,阳性率为0.28%(1/356);新埃立克体属病原阳性序列12例,阳性率为3.37%(12/356)。结论 中国陆路边境重点口岸鼠形动物存在埃立克体和新埃立克体的自然感染,部分口岸新埃立克体感染率较高,应加强该区域的蜱类监测和防控宣传。

目的 验证复方非泼罗尼滴剂对犬体寄生蜱的驱杀效果。方法 从我国南方和北方共收集140例自然感染蜱的犬,随机分配至南方试验药物组、南方对照药物组、北方试验药物组和北方对照药物组,每组35只,按推荐剂量对各试验犬进行治疗,在用药前、用药后1、7、14、21和28 d对患犬进行蜱计数,统计分析蜱平均减少率和患犬转阴率。结果 用药后28 d,南方试验药物组和对照药物组蜱平均减少率均为100%,北方试验药物组和对照药物组蜱平均减少率也均为100%,所有受试动物用药后均未出现其他临床症状和不良反应。结论 复方非泼罗尼滴剂用于防治犬体寄生蜱,用药1次疗效可持续28 d,且对南北不同地区犬的蜱病治疗效果无明显差异,可用于我国不同地区犬蜱的防治。

目的 了解苏州市蟑螂密度、种类构成、季节消长规律,为蟑螂的科学防控提供理论依据。方法 2019—2023年,采用粘捕法进行蟑螂种群监测,并对监测数据进行统计学分析。粘捕率之间的比较采用χ²检验,蟑螂密度之间的比较采用Kruskal-Wallis H秩和检验。结果 2019—2023年,苏州共布放有效粘蟑纸数27 576张,阳性张数2 248张,共捕获蟑螂15 963只,粘捕率为8.15%,密度为0.58只/张;德国小蠊是苏州主要优势种,占比为95.76%。2019—2023年蟑螂的粘捕率和密度均逐年下降,不同年份蟑螂的粘捕率差异具有统计学意义(χ²=96.913,P＜0.001)。不同生境中农贸市场蟑螂粘捕率和密度均最高,分别为25.89%和2.36只/张,不同生境蟑螂的粘捕率差异具有统计学意义(χ²=2 458.309,P＜0.001)。蟑螂全年活动,不同年份蟑螂密度高峰所在月份不同,总体密度高峰在11月为0.66只/张,不同年份蟑螂密度季节消长差异有统计学意义(H=23.976,P<0.001)。结论 苏州市2019—2023年蟑螂密度总体呈下降趋势;蟑螂的主要侵害场所是农贸市场,其全年均有活动,不同年份蟑螂密度季节消长波动较大。在蟑螂的防制过程中,应根据其活动规律,采取有效的防制措施降低蟑螂密度。

嗜酸性粒细胞增多症是一组高度异质性疾病,表现为外周嗜酸性粒细胞绝对计数增多,可累计1个或多个以上器官,寄生虫感染是嗜酸性粒细胞升高的常见病因之一,但常被忽视。肝裂头蚴病至今在世界范围内没有明确的诊断指南,仅有散在的病例报道。本文报道1例疑似肝裂头蚴病诱发高嗜酸性粒细胞增多症患者,探讨其临床特征及治疗方案,以加深临床医师对肝裂头蚴病鉴别诊断及高嗜酸性粒细胞增多症诊治的认识。

蜱是一类重要医学节肢动物,在世界范围内广泛分布,能够传播多种人类和动物病原体,是仅次于蚊虫的第二大传染病媒介生物。近年来,城市化、国际贸易和气候变化等因素显著增加了蜱传病发病率,新发蜱传自然疫源性疾病也与日俱增。由于不同蜱种所能携带或传播的病原体不尽相同,查清在不同地理区域分布的蜱对于预防和控制蜱及蜱传疾病至关重要。因此,快速准确鉴定蜱的种类在蜱传疫病流行病学调查及防控方面均具有重要意义。本文综述了蜱的分子鉴定技术研究进展,为相关工作提供参考。