恶性疟原虫PfMAg-1蛋白为裂殖子表面相关蛋白,为了探究PfMAg-1的功能,本研究采用规律成簇间隔短回文重复及相关失活蛋白(Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/dead CRISPR-associated protein 9, CRISPR/dCas9)技术,构建恶性疟原虫PfMAg-1低表达质粒,电穿孔方法转染后通过抗稻瘟菌素(Blasticidin S Deaminase,BSD)筛选出恶性疟原虫MAg1^KD(Knock Down,KD)虫株。通过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)、实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction, qRT-PCR)检测PfMAg-1表达水平。在体外培养条件下观察MAg1^KD虫株生长趋势及裂殖子入侵效率来评价PfMAg-1的表达对恶性疟原虫红内期增殖的影响。结果表明,恶性疟原虫MAg1^KD虫株较对照虫株的体外生长率显著降低,进一步实验提示影响疟原虫增殖速度的原因是MAg1^KD虫株裂殖子入侵效率下降。本研究证实PfMAg-1在恶性疟原虫裂殖子入侵红细胞时发挥重要作用,为进一步评价PfMAg-1蛋白作为疟疾疫苗候选抗原的前景提供了实验依据。

为了探讨日本血吸虫成虫抗原(SWA)对LX-2细胞NLRP3炎症小体活化和纤维化相关基因表达的影响,以及活性氧(ROS)在其中的作用,本文首先采用不同浓度(0、25、50、100 μg/mL)的SWA刺激LX-2细胞,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA和ColⅠ的基因和蛋白表达,ELISA检测细胞IL-1β的分泌水平;同时使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞LDH的释放;流式细胞术检测SWA刺激对LX-2细胞中ROS产生的影响;之后使用ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)处理细胞,检测NLRP3、IL-1β、Caspase-1、α-SMA、ColⅠ基因和蛋白的表达水平。结果显示,当SWA的浓度达100 μg/mL时,LX-2细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA和ColⅠ的mRNA的表达与对照组相比均明显升高,同时相关蛋白的表达和IL-1β的分泌也显著升高。流式检测结果显示,SWA刺激LX-2细胞后能显著增加细胞内ROS的生成,并在NAC处理后,可见明显抑制细胞内ColⅠ和炎症小体活化相关的基因和蛋白的表达。结果提示,SWA可以诱导LX-2细胞内炎症小体活化和胶原表达,并且ROS反应可能在介导NLRP3活化中发挥重要的作用。

登革4型病毒近年来在我国东南沿海地区时有流行,威胁人民健康与公共卫生安全。本研究以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架,通过反向遗传学技术构建了携带登革4型病毒主要结构蛋白prM/E基因重组嵌合病毒(ChinDENV4);进一步通过蚀斑、生长曲线、动物实验等对其生物学特征进行了鉴定。结果显示,重组嵌合病毒ChinDENV4可高效表达登革4型病毒的结构蛋白,蚀斑大小与亲本株类似;ChinDENV4并能够在BHK-21、C6/36等细胞中高效复制,滴度分别达到1.26×10⁵和1.58×10⁶ PFU/mL。更重要的是,嵌合病毒ChinDENV4在乳鼠模型中的神经毒力显著弱于亲本株。本研究成功构建了乙脑/登革4型嵌合病毒,为下一步四价嵌合登革减毒活疫苗研究奠定了重要基础。

本文旨在探讨白纹伊蚊Aedes albopictus唾液腺匀浆粗蛋白(salivary gland extract,SGE)血小板聚集抑制和抗凝血活性,为后续单个唾液蛋白在蚊虫吸血中的功能研究奠定基础。采用比浊法检测低、中、高浓度SGE在不同血小板聚集激活剂作用下对人血小板聚集活性的影响,手工法检测不同浓度SGE对人全血部分凝血活酶时间,凝血酶原时间,凝血酶时间的影响。结果显示,低浓度SGE对Ⅰ型胶原诱导的血小板聚集有显著抑制作用,随着浓度升高具有明显的量效关系,最高抑制率可达90.36%;高浓度SGE对凝血酶诱导的血小板聚集具有显著抑制作用。SGE对ADP诱导的血小板聚集无明显抑制作用。SGE对人血浆APTT、PT、TT均有延迟效应,1.25 ng/mL SGE即对TT有显著延迟效应。研究结果表明,白纹伊蚊SGE不仅对胶原诱导的血小板聚集有明显的抑制作用,而且可作用于血液级联凝集全过程。

以海南、福建等省常见库蠓为研究对象,构建基于ITS的吸血库蠓成虫分子鉴定体系。共24种库蠓的72条序列用于比较分析、遗传距离和系统发育分析显示:24种库蠓的种间遗传距离为0.05～0.39,平均遗传距离0.25;种内遗传距离为0～0.13,平均遗传距离0.07。种间遗传距离为种内遗传距离的3.57倍,表明ITS基因具有较大的种间甚至种内变异性,是理想的靶标基因,可作为库蠓种类鉴定的分子标记。

本研究对贵州安顺地区嗜尸性蝇类群落多样性及季节变化进行了调查,采用α多样性测度方法,分析了多样性指数、相似性系数、均匀度指数和优势度指数、物种丰富度。结果显示,安顺地区嗜尸性蝇类共计28种,隶属7科20属,其中丰富度最高是丽蝇科(Calliphoridae),丰富度达13;其次为蝇科(Muscidae)和麻蝇科(Sarcophagidae),丰富度分别为6和5。从各科个体数来看,丽蝇科(Calliphoridae)最多,共13 309头;蝇科(Muscidae)次之,共435头;麻蝇科(Sarcophagidae)第3,共207头。嗜尸性蝇类物种丰富指数、相似性系数、均匀度指数、多样性指数及优势度指数随季节变化而变化。嗜尸性蝇类的物种丰富度指数以夏季和秋季最高,分别为19和16;其次为春季和冬季,丰富度指数分别为14和9。科级多样性指数冬季最高,为0.7780;属级多样性指数春季最高,为1.2430;种级多样性指数春季最高,为1.6122。优势度指数冬季最高,为0.5950,均匀度指数冬季最高,为1.482143。本研究表明贵州安顺地区嗜尸性蝇类种类丰富,生态环境较好。

某部2007—2016年共报告恙虫病240例,无死亡病例。其中83.75%病例为临床诊断病例;90.83%的病例集中出现在6—11月;95%的病例发病年龄为30岁以下的年轻人为主,89.17%为战士。据此,建议野外执勤和训练时加强个人防护,防恙螨叮咬,高发季节对营区进行除草和灭杀恙螨,降低恙虫病对部队官兵健康的危害。

调查赤峰市在校大学生蠕形螨感染状况、认知状况,并分析其影响因素。采用透明胶纸法对1 045名大学生进行蠕形螨标本采集,并对受检者开展问卷调查,分析蠕形螨感染影响因素。在校大学生总感染率为50.31％,无地域差异。483例感染者中毛囊蠕形螨感染居多,占69.36％,轻度感染占77.64％。不同肤质调查对象感染率差异无统计学意义(P＞0.05)。面部皮肤有症状者(66.05％)的感染率高于正常对照(33.95％),有统计学差异(P＜0.05)。赤峰在校大学生掌握蠕形螨一般知识,但对蠕形螨传播途径与治疗方法知晓率低,学校应在校园内媒体加强蠕形螨防治知识宣传。

报道1例卵形疟原虫感染病例,并分析其流行病学意义,为临床诊治提供参考资料。用疟原虫快速诊断试剂盒(RDT)检测病人血样,用姬氏染色显微镜检查外周血卵形疟原虫滋养体,用巢式PCR对虫种分型,上述3种方法检测结果均为卵形疟原虫,结合患者病史及出入境史最终确诊为输入性卵形疟原虫感染。卵形疟既有再燃又有复发,分析其流行病学资料对防治本病具有重要意义。

对2017年河南口岸入境的2例发热归国人员进行医学巡诊和流行病学调查,提取2例发热归国者血清样本中核酸,进行实时荧光RT-PCR检测。结果显示,登革热病毒通用型核酸阳性,分型鉴定均为登革热病毒Ⅱ型核酸阳性,证实属于境外染疫,疫源地分别为斯里兰卡和泰国。随即对患者进行后续医疗援助,直至疾病康复无传染性。本结果提示应根据国际疫情动态变动形势,加强对口岸输入性病例精准防控。

为寻求最有效混配浓度,有效防治鼠疫媒介蚤种印鼠客蚤,本文使用药膜法对苯醚威、氯氰菊酯浓度梯度进行毒效试验,通过不同浓度的死亡率观察,直线回归法计算半数致死浓度和相关系数,按比例混合法将两药半数致死浓度转化为剂量然后混合配比为6个剂量组,最后获得最有效配比浓度。结果显示,苯醚威、氯氰菊酯对印鼠客蚤未吸血新羽化成虫的LC₅₀分别为1 647.9752、8.4861 mg/L;苯醚威6 mg/L,1 000 mg/L氯氰菊酯混配试剂对印鼠客蚤未吸血新羽化成虫的毒杀效果最佳,24 h死亡率70%,苯醚威和氯氰菊酯混配剂对印鼠客蚤未吸血新羽化成虫有增效作用。