为探讨重组弓形虫棒状体蛋白5诱导的免疫应答及其免疫保护效应,本研究克隆表达了弓形虫棒状体蛋白5,并分析其诱导的细胞免疫、体液免疫应答和抗弓形虫感染的保护作用。采用PCR方法从刚地弓形虫eDNA中扩增出ROP5基因片段,将该基因片段克隆至pET-28a原核表达载体表达,用重组ROP5蛋白免疫BALB/e小鼠,ELISA检测免疫后小鼠抗体和细胞因子的变化。以强毒型RH株弓形虫攻击感染免疫小鼠,统计小鼠不同时间存活率,评价重组蛋白产生的免疫保护性。结果表明ROP5重组蛋白疫苗免疫BALB/e小鼠诱导机体产生高水平的IgG、IgG1、IgG2a 抗体和IFN-r、IL-2及IL-10细胞因子。与PBS及佐剂对照组相比,重组蛋白免疫组小鼠的存活时间明显延长。本实验证实了ROP5重组蛋白免疫BALB/c小鼠能够诱导其产生高水平的体液免疫和细胞免疫应答,以及--定的抗弓形虫感染保护作用。

本研究用 立克次体属特异的gltA和ompB基因扩增引物,从吉林长白县捕获鼠中分拣的534只厩真厉螨中扩得gltA和ompB基因片段。通过基因片段的序列测定、BLAST比对和系统发育分析,显示两个扩增基因与猫立克次体Rickeltsia felis 同源性最高(99%),证明该地区厩真厉螨携带与猫立克次体近缘的立克次体。

前酚氧化酶是一种黑色素合成酶, 是节肢动物体内的一种重要免疫蛋白。为了克隆中华按蚊Anopheles sinensis 前酚氧化酶(Prophenoloxidase, PPO)基因部分序列,根据已报道的多种昆虫PPO氨基酸的保守序列设计简并引物,以中华按蚊总RNA为模板进行RT-PCR扩增,目的片段经TA克隆后测序。所得中华按蚊PPO基因(ASPPO)部分序列长597bp,编码199个氨基酸;与几种近缘蚊种的PPO基因序列同源性分别达57% ~ 100%不等。经在线比对,该序列在基因组中分属两个外显子区域,中间含有一个内含子。推导的氨基酸序列含有两个铜离子结合位点,与目标序列相符,表明成功克隆出ASPPO部分序列。所得序列登录GenBank,登录号: JX295575, JX295576。 推导的氨基酸序列提交瑞士蛋白质空间构象模拟平台Swiss-model,以冈比亚按蚊免疫相关前酚氧化酶为模板进行空间3D构象模拟,SPDview软件分析拉氏构象图。结果显示拉氏构象得分较高而QMEAN得分较低,近似跨膜蛋白值,提示该该蛋白是否为中华按蚊中肠和血淋巴疟原虫免疫蛋白尚不确定,需进一步研究。

为从家蝇Ⅲ龄幼虫体内提取具有抗K562细胞活性的物质,并对其组分化学性质及对人正常细胞的作用进行分析。本文用大肠杆菌诱导家蝇Ⅲ龄幼虫大量表达活性物质,然后通过研磨、离心、固相萃取法(SPE)初步分离活性物质,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)进一步纯化提取活性组分,通过四甲基偶氮噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)比色法和光镜观察法相结合,筛选出对K562有抑制作用的活性组分,并鉴定其对人正常细胞293T的作用。结果显示,从家蝇Ⅲ龄幼虫体内分离出4个具有抑制K562细胞活性的多肽组分(峰5~8), 具有分离度高、纯度高等特点。当质量浓度为100 μg/mL 和作用时间为24h时,4个多肽组分均具有抗K562细胞的活性,其中峰5多肽组分和峰8多肽组分活性较强,对K562细胞的相对抑制率分别为48. 52%和65.80%。结果表明,家蝇Ⅲ龄幼虫体内存在一-些具有抗K562细胞活性的多肽,而且对人正常细胞几乎无杀伤作用。但是,这些多肽是否属于抗肿瘤肽还有待被证实。

微小按蚊Anopheles minimus是云南省勐腊地区的重要传疟媒介,DDT 和拟除虫菊酯类杀虫剂在该地区长期大量使用,研究微小按蚊与kdr抗性密切相关的para型钠通道基因对该地区选择合理的媒介控制方案预防和阻断疟疾的流行提供理依据。本文分别于2010和2011年9~10月在云南省勐腊县龙塘村和东方红村现场采集微小按蚊后,用分子学方法进行分型,根据GenBank发布的微小按蚊para钠通道IIS6 段基因组DNA序列设计特异性引物,扩增现场采集的微小按蚊的该段基因,并测序对比。通过对415个个体的检测发现,1014 位点编码的TTA氨基酸密码子没有突变,说明截止目前云南勐腊地区微小按蚊对DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂抗性的kdr分子机制尚未出现,其击倒抗性较低,对DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂仍然保持敏感。

本文研究 了室内饲养的美洲大蠊对3种不同含水率的材质的产卵喜好性。结果表明蟑螂比较喜欢在干燥的土壤中产卵,土壤和沙的含水率越高,蟑螂的产卵量越少,木削的含水率40%以下不影响蟑螂的产卵选择。3种物质中蟑螂在沙子中产卵量较少。

为了解无锡4种常见蚊虫的CO I基因特征和蚊虫分子系统进化关系,对无锡淡色库蚊、白纹伊蚊、骚扰阿蚊和中华按蚊的CO I基因序列进行扩增、测序,在GenBank中对序列进行同源性比对,分析基因特征、颠换率、遗传距离,利用MEGA4. 1构建分子系统树。结果显示,4种蚊虫的CO I基因序列扩增长度为699 ~717 bp,CC含量为30. 62% ~32. 49%,种间颠换率为11. 74% ~15. 49%,种间遗传距离为0.121~0.151; 每种蚊虫为单系群的支持值都为100。 CO I基因具有种属特异性,可以用于4种常见蚊虫的分类鉴别。

本文首次测定和分析缓慢细蚤Leptopsylla segnis (Schonherr, 1811)和距 细蚤Leptopsylla lauta(Rothschild, 1913) 的rDNA-ITS2序列,为蚤的分类和系统发育研究提供有意义的基础资料。通过聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR) 扩增缓慢细蚤L. segnis 和距细蚤L. lauta 各3个个体的rDNA-ITS2序列,并对扩增产物进行PCR直接测序和分析。结果显示,缓慢细蚤和距细蚤的rDNA-ITS2序列的长度均为309 bp;缓慢细蚤序列的CG含量为50.9% ~52. 1% ;距细蚤序列的CG含量为49.5% ~50. 6%。缓慢细蚤与距细蚤的rDNA-ITS2序列有16个碱基不同,其中7个是颠换,9个为转换,两种细蚤之间有一定差异。

本文描述寄生虎纹伯劳Lanius tigrinus 的一种疟原虫,该虫有性体、裂殖体都很小,而且成熟裂殖体几乎观察不到细胞质,所以将该疟原虫归为诺维亚属Novyella,命名为伯劳疟原虫Plasmodium(Novyella)lanius sp. nov.

本文记述了我国麻虻属毛股麻虻组Haematopotapilosifemuragroup--新纪录一突缘麻虻Haematopota procyon Stone et Philip, 1974。 标本保存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。

Subolesin 是一种进化上保守的蛋白,在蜱类传播病原中发挥重要作用。本文综述了subolesin 对于蜱的繁殖、发育、病原感染与传播等几个方面的研究进展,并且评价其作为传播阻断疫苗,在监测蜱类叮咬并预防蜱传疾病中的应用前景。

杆状病毒 是昆虫专一性的病原病毒,杆状病毒表达系统是当今基因工程四大表达系统之一。本文对杆状病毒表达系统构成元素(转移载体、亲本病毒和重组介质)的发展以及应用作了详细的论述,其应用一是在农业生产中开发作为生物杀虫剂,二是生物分子基础研究中重组蛋白的表达,三是医学研究中的基因治疗、疫苗开发和药物筛选。