本研究应用抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)建立敏感、特异的检测循环抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。用SEA皮下多点注射法免疫海蓝鸡,水稀释法制备IgY抗体,以辣根过氧化物酶标记纯化的IgY抗体(IgY-E)和兔抗IgG抗体(IgG—E)分别作为检测抗体,IgY抗体和兔抗IgG抗体分别作为捕捉抗体,组合建立4种双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELIsA)检测循环抗原,分析各种方法检测SEA的灵敏度,并平行检测急性日本血吸虫病人血清6份、慢性日本血吸虫病人血清29份、华支睾阳性者血清9份、卫氏并殖吸虫阳性者血清15份、弓形虫阳性病人血清7份、正常体检者血清118份。结果显示,以IgY为捕捉抗体或检测抗体,可检测到浓度为7.5 ng/mL的SEA,灵敏度是基于IgG的夹心ELIsA的4倍。4种夹心ELIsA法检测急血病人血清阳性率均为100％,检测正常人血清的特异性为99.1％;与弓形虫、华支睾吸虫阳性者血清无交叉反应;而检测慢血病人血清和并殖吸虫阳性者血清时,以IgY为捕捉抗体的2种ELISA(IgY+IgY—E、IgY+IgG—E)阳性率均分别为79.3％、6.7％;而IgG为捕捉抗体时,以IgY为检测抗体(IgG+IgY—E)时的阳性率分别为75.8％、6.7％,以IgG为检测抗体(IgG+IgG-E)时的阳性率分别为72.4％、13.3％,以IgY作为捕捉抗体的检测效果优于IgG。基于IgY抗体的双抗体夹心ELIsA检测循环抗原具有良好的敏感性和特异性,可用于日本血吸虫病的免疫诊断。

为掌握云南景洪市蚊虫季节消长特点及其与乙型脑炎流行的关系,为该疾病防控提供有效依据,2007年10月至2008年9月本研究在云南景洪市普文镇畜圈和人房每月采用诱蚊灯方法通宵捕蚊,对采获的蚊虫使用白纹伊蚊c6/36细胞培养法分离乙脑病毒,并对分离到的病毒进行分子生物学鉴定。收集2007~2008年景洪市乙脑疫情资料进行乙脑病例按月分布分析。2007年10月至2008年9月共采集4属18种18 194只蚊虫,三带喙库蚊占82.79％(15 064/18 194),其中,在畜圈和人房采集的蚊虫均以三带喙库蚊构成比最高,分别为83.44％(14 942/17 908)和42.66％(122/286)。2007和2008年景洪市共报告乙脑病例50例,在三带喙库蚊密度高峰月份(5月)开始出现乙脑病例,乙脑病例高峰月份(6月)比三带喙库蚊密度高峰晚1个月出现。从捕获的三带喙库蚊和中华按蚊中共分离到5株具有细胞病变的样本,经乙脑病毒RT—PcR检测、BLAsT序列比对及进化树分析均属于基因1型乙型脑炎病毒。其中,在流行季节高峰前的5月,从三带喙库蚊中分离到1株乙脑病毒;在流行季节后采集的三带喙库蚊和中华按蚊中各分离到3株和1株乙脑病毒。本研究结果表明,乙脑发病与三带喙库蚊的季节消长密切相关,三带喙库蚊是当地主要传播媒介,景洪市近年乙型脑炎可能主要是基因1型乙脑病毒流行。结果提示当地防疫部门应在流行高峰前开展防蚊灭蚊措施,特别是加强乙脑疫苗接种工作,在流行季节(5—7月)积极开展病例监测。

本文调查和探讨我国西南山地蚊类物种多样性与多度的空间分布格局及其关系。以滇西北“三江并流”自然遗产地金沙江流域(北纬26°00’~28°30’;东经99°00’-10l°00’和海拔1 500~3 500 m之间)为调查研究的空间范围,应用灯诱法对16个乡镇居民区蚊类多样性进行调查取样、统计和分析。结果共捕获蚊类2亚科6属37种共63 036只,其中,三带喙库蚊Culex. tritaeniorhynchus不仅数量多且分布较广,为优势蚊种;希氏库蚊Cx.theileri致倦库蚊Cx. pipiensquingue fasciatus和中华按蚊Anopheles.sinensis分布广泛或数量相对较多,为常见蚊种,他们为当地的主要蚊种。调查发现,金沙江流域蚊类物种丰富度和物种多样性指数的沿纬度和海拔的分布基本呈中部高两头低的单峰分布格局。蚊类物种多样性与密度、主要蚊种多度之间关系分析显示：1)三带喙库蚊多度与蚊类密度(r=0.919)和生态优势度(r=0.768)之间呈显著正相关,而与物种多样性(r=一o.887)和均匀度(r=一0.898)之间呈显著负相关;2)蚊类密度与物种多样性(r=一O.747)和均匀度指数(r=一O.756)之间呈显著负相关,而与生态优势度(r=0.764)呈显著正相关;3)希氏库蚊多度与物种多样性(r=0.644)、均匀度(r=O.721)呈显著正相关,而与生态优势度(r=一O.615)、密度(r=一0.566)和三带喙库蚊多度(r=一0.640)呈负相关;4)致倦库蚊和中华按蚊的多度仅与三带喙库蚊(r=一O.497、一O.177)呈负相关外,它们与密度、物种多样性、均匀度、生态优势度和希氏库蚊多度之间关系均不明显;5)蚊类密度、主要蚊种多度与物种丰富度之间的关系均不明显。结果表明,金沙江流域蚊类物种多样性沿纬度和海拔的分布基本为单峰分布格局,其分布格局与蚊类密度和主要蚊种多度相关。其中,优势种三带喙库蚊多度主导了金沙江流域蚊类的密度、生态优势度及物种多样性的变化趋势和分布格局;其次,常见种希氏库蚊多度对当地蚊类密度、生态优势度和物种多样性的格局和变化具有重要作用。

为调查和了解云南省瑞丽市中缅边境蚊虫多样性状况,应用灯诱法和采集幼虫法对瑞丽市中缅边境上高丽村和周边方圆4km原始森林内的蚊虫的优势种组成、蚊虫群落结构的集中性指数、多样性指数和均匀度指数进行分析。结果显示,在居民区共采获蚊虫3305只,共5属13种,隶属于蚊科Culicidae中的伊蚊属Aedes、 库蚊属Culex、 按蚊属Anopheles、 曼蚊属Mansonia 和阿蚊属Armigeres。其中优势种蚊虫为三带喙库蚊和中华按蚊。在非居民区共采或蚊虫200只,共5属21种,隶属于蚊科Culicidae中的伊蚊属、库蚊属、按蚊属、巨蚊属Toxorhynchites 和蓝带蚊属Uanotaenia。 其中优势种蚊虫为白纹伊蚊、拟态库蚊。由于自然环境的破坏, 居民区优势集中度过高,群落结构不均匀,非居民区多样性较差,群落内物种的均匀度也偏低。

为科学有效开展城市灭蚊,采用诱蚊灯法研究城市蚊虫种类的主要组成和综合治理前后种类组成的变化,结果显示在南京城区监测到淡色库蚊(Culex pipiens pallrs)、三带喙库蚊(Culex tritaeniorhynchus)、白纹伊蚊(Aedes albopictus)、 中华按蚊(Anopheles sinensis) 4种蚊种,分别占32. 9%、62. 0%、2.4%和2. 7%;无论是对照区还是试验区,淡色库蚊和三带喙库蚊所占比例均分别超过30%和60%。从季节变化来看,从7月到9月上旬,三带喙库蚊所占比例高于淡色库蚊;从9月下旬开始,三带喙库蚊数量减少,所占比例开始下降。比较对照区和试验区,2006 年淡色库蚊和三带喙库蚊的构成比两者差异均没有显著性意义(P>0.05)。 未发现三带喙库蚊孳生地。不能忽视三带喙库蚊可能对城市居民带来的危害,除淡色库蚊和白纹伊蚊外,三带喙库蚊也应作为城市蚊虫防治的重点对象。

在累范特地区采集到8种螫蝇亚科种类,包括螫蝇属3种,厩螫蝇Stomoxys calcitrans (Linnaeus,1758),南螫蝇Stomoxys sitens Rondani, 1873, 黑螫蝇Stomoxys nigra Macquart, 1851, 角蝇属2种,西方角蝇Haematobia iritans (Linnaeus, 1758), 微小角蝇Haematobia minuta (Bezzi, 1892),袭蝇属1种,斑袭蝇Stygeromyia maculosa Austen, 1907, 血喙蝇属2种,刺扰血喙蝇Haematobosca stimulans (Meigen, 1824)和长毛血喙蝇Haematobosca atripalpis (Bezzi, 1895)。其中厩螫蝇S. calcitrans 和西方角蝇H. irritans 为这些国家和地区的广布种,黑螫蝇S. nigra 和长毛血喙蝇H. atripalpis 为该地区的新记录种。南螫蝇S. sitens, 微小角蝇H.minuta和斑袭蝇S.maculosa为以色列外累范特地区的新记录种,刺扰血喙蝇H.stimulans已知仅分布在以色列。

2007年采用在口岸的港区、仓库、垃圾堆与自然生境的林地、草地、牧场、田地、堤坝处布置板夹与弓形夹的方法,对中俄边境中方(黑河市、逊克市、抚远市、饶河市)以及俄罗斯境内的3个边境口岸(布拉戈申斯维克、波利亚科沃镇、哈巴罗夫斯克市)进行了鼠类及体表寄生虫调查。结果显示,中国的4个口岸总捕获率1.8%,其中自然生境总捕获率14.37%。俄罗斯3个口岸总捕获率4.34%,其中自然生境布总捕获率11. 76%。本次调查共捕获鼠类11种,其中中方口岸黑线姬鼠Apodemus agrarius 为优势种,构成比占60%;俄方口岸黑线仓鼠Cricetulus barabensis (23%)和黑线姬鼠(29%)同为优势种,合计构成比52%。从所捕获的鼠类体表采集和鉴定了体表寄生虫,其中蚤9种、革螨4种和蜱3种。调查表明,中方抚远口岸、饶河口岸以及俄方的哈巴口岸啮齿动物捕获率较高,达10%~20%,故应密切关注流行性出血热在国境上的传入与传出。

为了解川西南地区小兽体表寄生虫染虫情况及其种类和组成,1987 ~ 1988年总共捕获小兽33种1 714只。从所有小兽体表共采获蚤类2157 只。分别隶属于5科、26属、46种;蜱类308只,分隶于1科、2属、6种;革螨1909只,分别隶属于4科、13属、37种。厩真厉螨Eulaelaps stabularis、 棕形额蚤Frontopsylla spadix、特新蚤Neopsylla specialis 为大耳姬鼠Apodemus latronum 优势寄生虫种;棕形额蚤F.spadix、特新蚤N. specialis 为高山姬鼠A. chevrieri 优势寄生虫种;福建厉螨Laelaps fukienensis 为社鼠Nwviventer confucianus优势寄生虫种;端凹栉眼蚤Ctenophthalmus dinormus为黑腹绒鼠Eothenomys melanogaster优势寄生虫种;似方双蚤Amphipsylla quadratoides和细钩盖蚤Citellophilus sparsilis为松田鼠Pitymys irene优势寄生虫种。

为了探索提取贵阳腐霉Pythium guiyangense菌株总RNA简便而有效的方法,我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁,再用市售RNA simple total RNA kit试剂盒提取总RNA,最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高,0D₂₆₀/0D₂₈₀ =2.093±0. 264,RNA 浓度为(0. 134±0.021) ug/μL, RNA 制备效率为(26. 76±4.10) μg/g菌丝体,并且该方法操作简便,重复性最好,是制备P. guiyangense 菌株总RNA的首选破壁方法。

本文记述山东省青岛崂山蚋属Simulium绳蚋亚属subgenus Gomphostilbia一新种,以康增佐教授的姓氏命名为康氏绳蚋S. (Gomphotilbia) kangi sp. nov. 该蚋与S. (G.) laoshanense Ren, An and Kang, 1998, S. (G.) mengi Chen, Zhang and Wen, 2000, S. (G.) gyorkosae Takaoka and Davies, 1996相似,但是,该新种的生殖叉突两臂中段较细,生殖板呈舌状,与其他种有明显不同。模式标本保存在军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。

我国的血蜱属Genus Haemaphysalis Koch的蜱种,按Hoogstraal and Kim (1985) 的分类系统,归人11个亚属,即异尾血蜱亚属Subgenus Alloceraea Schultze 1918, 异盲血蜱亚属Subgenus Allophysalis Hoogstraal 1959,原生血蜱亚属Subgenus Aboimisalis Santos Dias 1963, 爬中血蜱亚属Subgenus Herpetobia Canestrini 1890,指名血蜱亚属Subgenus Haemaphysalis (s. str.) Koch 1844,皇冠血蜱亚属Subgenus Kaiseriana Santos Dias 1963, 阿布血蜱亚属Subgenus Aborphysalis Hoogstral, Dhanda et EI Kammah 1971, 后突血蜱亚属 Subgenus Segali Santos Dias 1968, 后饰血蜱亚属Subgenus Garmhamaphysalis Santos Dias 1968,嗜鸟血蜱亚属 Subgenus Ornithophilis Hoogstraal et Wassef 1973,和伞冠血蜱亚属subgenus Rhipistoma Koch 1844。 本文对这 11个亚属的特征作了记述,在此基础上,编制了分亚属检索表。

本文分析了1例输人性潜蚤病患者的临床表现和发病特点。