Rab鸟苷三磷酸酶是细胞膜转运机制的关键调节分子,与原虫的分泌功能密切相关。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫Rab6鸟苷三磷酸酶同源基因,以便进一步探讨其功能。作者从阴道毛滴虫cDNA表达文库中分离出2个Rab6鸟苷三磷酸酶同源基因的cDNA克隆,其中1个cDNA序列长658对碱基,读码框含597对碱基,推测蛋白质序列具198个氨基酸。序列分析表明该氨基酸序列与Rab6a蛋白亚家族的同源性最高。另一cDNA序列长764对碱基,读码框含657对碱基,推测蛋白质序列具218个氨基酸。序列比对分析显示该氨基酸序列与Rab6b蛋白有较高的同源性。2个氨基酸序列都拥有Rab鸟苷三磷酸酶家族的所有保守结构域、特异性RabF结构域和典型的异戊烯化结构域。进化树分析提示毛滴虫的这2个基因系Rab6家族的同源基因,在进化上更接近原虫和单细胞的酵母Rab6亚家族。序列分析还显示这2个基因都无内含子,其基因组DNA序列与其cDNA序列完全一致。

将微小隐孢子虫Cpgp40/15基因定向克隆到真核表达载体pVAX1中多克隆位点XbaⅠ和PstⅠ之间,经酶切鉴定,构建真核表达重组质粒pVAX1-Cpgp40/15,用脂质体介导法将其转染Hela细胞,并用G418加压筛选,后经SDS-PAGE和Western blot方法检测外源基因Cpgp40/15的表达情况,得到预期大小的蛋白带,表明该重组质粒能够在哺乳动物细胞中较好地表达。

为了进一步了解浙江宁海卫氏并殖吸虫(Paragonimus westermani)的遗传变异情况,对卫氏并殖吸虫不同种群进行ITS2序列分析研究。分别自浙江宁海小汀、宁海西溪(冷风洞)和宁海余山采集浙江华溪蟹,分离卫氏并殖吸虫囊蚴并进行ITS2序列PCR扩增分析。结果表明:浙江宁海三地卫氏并殖吸虫ITS2序列有363个碱基对,肺型肺吸虫和非肺型肺吸虫的ITS2序列完全相同;与泰国种群(AF159604,Nakorn Nayok省)核酸同源性为97.5%,两地卫氏并殖吸虫遗传变异较大。浙江宁海卫氏并殖吸虫与日本、韩国等地的卫氏并殖吸虫的核酸同源性均较高,属亚洲东北组群。

通过都匀牛带绦虫感染家猪,了解贵州省都匀是否存在牛带绦虫亚洲亚种。对都匀地区绦虫病患者进行驱虫,从孕节分离虫卵感染家猪,收集囊尾蚴并观察其特征。都匀牛带绦虫可以在家猪体内发育为囊尾蚴,感染率为87.5%。囊尾蚴回收率为0.266%,囊尾蚴只分布在肝脏,并以肝实质为多见。未成熟囊尾蚴最早在感染后10天发现。成熟囊尾蚴大小为(2 362±621)μm×(1 635±489)μm,外壁上有小的疣状形成物,头节上可见吸盘、顶突和两圈逗点样结构,未发现有明显小钩。家猪可以作为贵州都匀牛带绦虫的实验中间宿主,该地区可能存在牛带绦虫亚洲亚种局部流行。

本研究选用C6/36、BHK₂₁、Vero和Vero-E6 4株传代细胞进行西尼罗病毒的细胞敏感性试验,观察西尼罗病毒在各传代细胞系上细胞病变出现的时间以及病变特征。结果表明,该病毒在4种传代细胞出现CPE的时间及特征均有所不同,其中C6/36细胞对西尼罗病毒的细胞病变特征最为明显,出现时间适中,更适用于西尼罗病毒的组织培养研究。

美国1999年首次在纽约检测到西尼罗病毒(WNV)后,病毒快速在西半球传播,导致WNV大范围的流行,仅2005年,截止到12月20日美国共发生近2 799例人类感染病例。WNV如此快速的大面积扩散提醒我们要提高对WNV传入的警惕,提高对WNV传播过程的认识。本研究根据WNV生态学特点,构建WNV在媒介(蚊虫)与宿主(鸟类与人群)间感染传播的数学模型。模型建立3个种群(蚊虫、鸟、人)相互间的联系过程。通过WNV感染过程及模型推导出基本传染数R₀的计算公式,通过R₀的阈值确定WNV传播动力学,如果R₀≤1则说明疾病处于稳定状态,不会在局部范围内发生流行;如果R₀>1则说明疾病可在一定范围内发生流行。分析通过改变模型中参数提出应采取相应的控制措施,为进一步研究预防和控制WNV提供有力依据。

将淡色库蚊乙酰胆碱酯酶基因作为目的基因插入到昆虫杆状病毒表达系统的pFastBac1供体质粒中,利用Tn7转座子同Bacmid DNA同源重组,获得了含目的基因片段的重组杆状病毒DNA,并利用其转染Sf?9昆虫细胞,72h后收集细胞悬液,再用该悬液侵染Sf?9昆虫细胞,48h后收获重组蛋白。以碘化硫代乙酰胆碱为底物,检测重组表达AChE1的生物学活性,结果显示细胞上清中和细胞内的重组表达酶均具有生物学活性,采用SDS-PAGE检测也获得了与预期一致的结果。

本文用低氧水刺激感染登革Ⅱ型病毒的白纹伊蚊滞育卵孵化,按时间顺序共收集孵化的7批幼虫,仅在最先孵化的两批幼虫中检测到病毒,而在此之后孵化的幼虫都没有检测到病毒,推测感染病毒的滞育卵在低氧水的刺激作用下比没有感染病毒的滞育卵更易解除滞育,使得先孵化的蚊虫检测的阳性率较高。感染滞育卵孵化的幼虫最低感染率为1∶131.25(0.76%),明显低于非滞育卵最低感染率1∶82.5(1.21%),即垂直感染登革病毒影响卵的孵化和低龄幼虫的成活。单管饲养法获得经感染滞育卵孵化的F₁代单只雌蚊产卵量,被感染的白纹伊蚊平均单只雌蚊产卵量与未感染雌蚊没有显著性差异(P>0.05),即垂直感染病毒对F₁代雌蚊产卵量无显著影响。

用免疫印迹和酶联免疫吸附试验分析普氏立克次体N端和C端重组蛋白,发现2个重组蛋白除与普氏立克次体免疫血清发生特异性反应外,并与立氏立克次体免疫血清发生反应,这2种立克次体也被这2个重组蛋白免疫血清所识别,提示这2个重组蛋白含有普氏和立氏立克次体的共同抗原决定簇。

本文记述黑龙江省饶河县五林洞蚋属Simulium纺蚋亚属Nevenmannia一新种,以产地命名为五林洞纺蚋S.(N.)wulindongense sp.nov.。该蚋与S.(N.)vernum Macquart,1826,S.(N.)costotum Friederichs,1920,S.(N.)qingshuiense Chen,2001,S.(N.)meigeni Rubtlov and Carlsson,1965,S.(N.)caudisclerum Takaoka and Davies,1995相似,但是,生殖叉突、肛上板、生殖腹板、生殖叉骨、蛹呼吸丝的形状和足的颜色均有明显差异.模式标本保存在北京军事医学科学院医学昆虫标本馆.

努比亚污蝇Wohlfahrtia nuba(Wiedemann,1830)隶属双翅目麻蝇科,在中国未见分布。2004年9月上海国际机场检验检疫局从入境飞机上截获了1♂,该种与中国现有分布的巴彦污蝇Wohlfahrtia balassogloi(Portschinsky,1882)相近,但外形及外生殖器有区别。特对该种作重新描述、绘图并与巴彦污蝇对比。

捻转血矛线虫免疫机理的研究是研制捻转血矛线虫疫苗研究的基础和关键。随着捻转血矛线虫免疫机理研究的深入,已经清楚捻转血矛线虫的免疫机理主要包括 “快速排斥”和“迟发性排斥”2种排斥机制。在这2种排斥机理中起主要作用的是CD4⁺T淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、分泌特异性抗体(IgA、IgE、IgG1)的B淋巴细胞和能引起Ⅰ型变态反应的肥大细胞。其中CD4⁺T淋巴细胞受到抗原刺激后会向CD4⁺Th2型T细胞方向发展并起主导作用。在不同的条件下这些细胞和特异性抗体的出现会有所不同,特别是采取不同的抗原免疫动物时这种不同反应会很明显。本文着重阐述了捻转血矛线虫的免疫机理及其在不同抗原刺激条件下机体的反应,希望对研究和开发抗捻转血矛线虫疫苗有所帮助。

为了调查青少年齿龈内阿米巴的感染情况,探讨其与口腔疾患的关系。采用二级整群抽样方法抽取承德市中小学生559人,同时随机抽取口腔医院儿科门诊患者220人。以消毒牙签取受检者口腔齿龈上或病灶表面附着物,生理盐水涂片,光学显微镜下观察。其结果显示,齿龈内阿米巴感染与性别、年龄、地域无关。而与口腔卫生习惯、所使用的牙膏类型以及是否患有口腔疾病有关:经常刷牙者齿龈内阿米巴感染率明显低于不经常刷牙者(χ²=9.47,P<0.01);使用普通牙膏的齿龈内阿米巴感染率显著低于使用药物牙膏者(χ²=8.38,P<0.01);有口腔疾病的患者齿龈内阿米巴感染率明显高于健康者(P<0.01),在各种口腔疾病中,牙周炎患者的齿龈内阿米巴感染率最高(χ²=20.02,P<0.01)。表明齿龈内阿米巴感染与口腔疾病密切相关。

本文简要介绍了一种新型媒介生物采样系统的研制与应用情况。新型媒介生物采样箱突破了以往单一目标采样的局限,实现了多目标复合采样的目的。同时,针对流行病学侦检和生物入侵检验的要求,采用了多样化的样本保存技术,以保证虫媒病原体分离、检测和分析的需要。新型的媒介生物采样箱也提高了操作者的生物防护水平,确保采样工作的安全性。