通过提取阴道毛滴虫mRNA ,逆转录合成cDNA ,PCR得到预期长度片段后 ,将其克隆到pUCm-T载体中进行PCR、酶切及测序分析 ,并与GeneBank中核苷酸序列进行同源性分析。再将其克隆至表达载体PET-32a。重组子用酶切、PCR和测序鉴定后 ,转化大肠杆菌并以异丙基 -B- D- 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达。从阴道毛滴虫临床分离株中扩增出 92 7bp的ap33的基因片段 ,构建重组质粒PET- 32a (+) - ap33;IPTG诱导后 ,SDS -PAGE显示表达产物的大小约 5 0kDa。

用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架 (ORF) ,与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E-coliX6 2 12 ,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4 5 5 0。经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S typhimurium的高效表达 ,表达产物占菌体总蛋白的 9 2 % ,重组蛋白分子量约为 19kDa。将重组减毒S typhimurium分别以 10 8或 10 9CFU 鸡经口免疫 4日龄岭南黄肉鸡 ,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG ,3周时抗体水平达到峰值 ;2 5日龄时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫后 3周 ,试验鸡分别经口攻击感染 5 0 0个E acervulina孢子化卵囊 ,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线 ;计数攻虫感染后第 3 5～ 9 5天卵囊总产量 ,2个免疫组分别能降低 2 5 . 1%和 4 6 . 4 %的卵囊产生。

为了观察复方蒿甲醚治疗恶性疟的临床疗效 ,以显微镜血检恶性疟原虫阳性患者为观察对象 ,复方蒿甲醚口服 ,3天 4次疗法 ,首剂服 4片 ,8、 2 4、 4 8h各服 4片 ,总剂量为 16片 ,服药后按时测量体温和血检原虫 ,并随访 2 8天 ,观察治疗效果。结果显示复方蒿甲醚治疗恶性疟 16 7例 ,平均退热时间为 2 0 . 4±8 4h ,原虫转阴时间为 37. 9± 7 9h ,2 4h原虫平均下降率 97. 4 % ,2 8天治愈率为 94 . 1% ,药后无明显不良反应。可见复方蒿甲醚治疗恶性疟疾具有良好的临床效果。

为建立简便、快速的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA)检测肿瘤患者血清弓形虫IgG抗体。本文将弓形虫抗原包被于硝酸纤维素薄膜上 ,用来检测肿瘤患者血清中的弓形虫IgG抗体 ,通过胶体金———SPA直接显色 ,阳性者出现红色斑点。用该法对 2 32名肿瘤患者血清和 2 6 0名正常体检者血清进行检测 ,阳性率分别为 11. 2 1%和 1. 92 %。与IHA法对比检测 ,其结果具有良好的一致性 ,总符合率为 99. 39%。结果显示 ,斑点金免疫渗滤法检测肿瘤患者血清中弓形虫抗体简便、快速 ,适于向基层推广。

为识别和克隆华支睾吸虫新基因 ,对华支睾cDNA质粒文库进行随机筛选并测序 ,并利用在线生物信息学工具进行序列分析 ,识别华支睾吸虫未知基因 ,同时根据PGEX -4T- 1多克隆位点及未知基因的序列设计引物 ,PCR扩增目的基因 ,并构建原核重组质粒。结果发现了CsvpB基因 ,其完整阅读框含 76 2个碱基 ,编码 2 5 4个氨基酸 ,理论分子量为 2 7. 7kDa。序列分析表明 ,CsvpB蛋白与其它物种的卵黄前体蛋白有较高的同源性 ,所构建的重组原核表达质粒PGEX- 4T- 1 vpB经PCR、双酶切及测序证实与目标基因相符。

于 2 0 0 4年 5月底至 6月底 ,在云南南部和西部虻科采集中 ,获得 19种麻虻 ,其中有 6个新种 ,分别命名为成勇麻虻Haematopotachengyongisp .nov .,建中麻虻Haematopotajianzhongisp .nov .,明庆麻虻Haematopotamingqingisp .nov .,阳刚麻虻Haematopotayanggangisp .nov .,永平麻虻Haematopotayongpingisp .nov .,和曾健麻虻Haematopotazengjianisp .nov .,2个我国新纪载 ,缅甸麻虻HaematopotaburmanicaSenio White ,192 2和瞿氏麻虻HaematopotaquiXu ,1999。模式标本保存在军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。

德国小蠊的若虫和雌、雄成虫 ,这 3类试虫的活体诱源都对德国小蠊具有明显的诱集作用和滞留作用。其中雄成虫的诱集活性最弱 ,若虫和雌成虫的诱集活性都较强。粪便也是聚集信息素的重要来源 ,3类试虫粪便的聚集活性都大于相应的活体诱源 ,其中若虫粪便的聚集活性和滞留活性最强 ,雄成虫粪便的活性最弱。若虫的体表和粪便粗提物对 5龄若虫都具有明显的引诱作用和滞留活性 ,而且粪便提取物的引诱活性和滞留活性显著高于体表提取物。正己烷和二氯甲烷都是聚集信息素的有效提取剂。若虫的粪便粗提物能够明显提高蟑螂毒饵的杀虫效果。

参照国标GB 13917. 1— 13917 .8 92《农药登记卫生杀虫剂室内药效试验方法》喷施一定剂量不同浓度的高效氯氰菊酯 ,用超氧化物歧化酶测定试剂盒测定德国小蠊SOD活性。结果显示 ,不同浓度的高效氯氰菊酯对德国小蠊SOD的诱导作用存在时效上的不同 ,从药物处理后 14 4h内SOD相对活性水平能达到的最高水平看 ,在一定程度上 ,药物的诱导作用与高效氯氰菊酯的浓度具有一定的正相关关系。可见高效氯氰菊酯对德国小蠊SOD有明显的诱导作用。

胶带或胶板用于蟑螂的监测已多年 ,本实验将其与药剂联合使用 ,将不同浓度的杀虫药剂涂于胶面上 ,将被试种群的德国小蠊粘于其上 ,2 4h后观察其死亡率。根据粘胶板上的不同药剂剂量 ,可以求出被试种群的死亡———剂量曲线 ,以实验室敏感种群的LC50 做为基数 ,便能够求出该种群的抗性指数。用该种方法对采自北京地区的 4个德国小蠊种群进行抗性检测 ,同时采用传统的药膜法对该 4个种群的击倒抗性进行测定 ,将此二者的结果进行比较 ,发现 4个种群的抗性大小的趋势基本一致。

为制定鼠疫控制方案 ,需查明鼠疫流行地区的蚤类组成、分布和季节消长。采用夹夜法和笼捕法捕获野外和住宅内鼠类 ,梳检体外寄生蚤 ;用粘蚤纸法调查室内游离蚤。共捕获 7种 (含 1未定种 )蚤 ,隶属于 4科 6属 ,其中印鼠客蚤是当地的优势蚤种 ,占 6 5. 0 0 % ;缓慢细蚤和不等单蚤是当地的常见蚤种 ,分别占 2 0 4 5 %和 14 . 18%。家栖鼠中黄胸鼠主要寄生蚤印鼠客蚤的年均染蚤指数为 0 . 88,褐家鼠主要寄生蚤印鼠客蚤的年均染蚤指数为 1.6 6 ,高峰期均为 6～ 10月 ;锡金小鼠主要寄生蚤印鼠客蚤年均染蚤指数为0. 35 ,高峰期为 6～ 7月。因此印鼠客蚤、缓慢细蚤和不等单蚤是鼠疫控制中的主要防治对象